高压蒸汽灭菌

（1）高压蒸汽灭菌 它是利用高温高压蒸汽进行灭菌的方法，这种方法可以杀死一切微生物，包括休眠孢子，这是一种广泛使用而有效的灭菌方法。但需要专门的设备，并且培养基或料中的部分养分会被破坏，还会使pH值降低一个单位左右。在栽培食用菌过程中，主要用于培养基、玻璃器皿和用具的灭菌。

高压蒸汽灭菌操作要注意下列事项：

①灭菌时必须将锅内的冷空气排除干净，否则不能达到灭菌的目的。因为空气的导热性能比水蒸气差得多，同时它的潜热也很小，灭菌锅内存有较多空气时，压力虽然升高，锅内温度也较低，在1.1kg/平方厘米压力下，空气未排除时，温度只能到达100℃，冷空气排除1/3时，温度可达到109℃；排除1/2时，温度可达到2/3，则可达到115℃；排尽后，温度可达到121℃。因此，在灭菌时，当气压表指针上升到0.1-0.5kg/平方厘米时，应打开放气阀，将锅内空气排除，待指针将至“0”后，再关上放气阀，从气压指针上升至要求的压力（如1.1kg/平方厘米）时开始计时；也可先打开放气阀，放气5分钟再关上。

②高压灭菌锅内放置的试管、菌种瓶、塑料袋等物不宜过多过挤，以利蒸汽渗透，特别是袋装培养基不能不能叠放紧压，否则会造成灭菌不彻底。

③灭菌完毕后，应缓慢放气，斜面试管培养基灭菌后应去掉热源，让气压表指针自然将至“0”后才可以开锅取出。放气过急，温度骤然降下，培养基和棉塞可能会被冲脱。

④灭菌的时间和压力要根据不同培养基的情况而定，过短达不到灭菌目的，过长会使一些养分遭到破坏。